EXPRESSION OF HIV TYPE 1 GLYCOPROTEIN 120 FROM A MEXICAN AIDS PATIENT IN A BACULOVIRUS SYSTEM

Autores/as

  • Gerardo Ramos Alfano Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)
  • Patricia Tamez-Guerra Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)
  • Lydia Rivera-Morales Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)
  • Reyes Tamez-Guerra Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)
  • Ricardo Gomez-Flores Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)
  • Cristina Rodriguez-Padilla Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, (Nuevo León,México)

Resumen

El objetivo principal del presente estudio fue la implementación de un sistema vector de expresión en baculovirus en células de insecto (IC-BECS), para la expresión de la proteína recombinante gp120 del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Para esto, se aislaron secuencias de la proteína gp120 de una paciente mexicano con SIDA, y del plásmido de referencia HXB2, los cuales
se clonaron en forma independiente en el plásmido pFastBac1. Posteriormente, se utilizaron estos plásmidos para transformar E. coli DH10Bac conteniendo el bacmido bMON14272 del baculovirus AcMNPV, para luego inducir una transposición sitio dirigida para transferir el genoma de gp120 del VIH al bacmido del baculovirus. Se detectó el baculovirus recombinante de Bac-69-1 (paciente) y
el plásmido de referencia Bac-HX-4, utilizando la técnica de PCR y la fenotipificación de colonias. Después se encapsuló el genoma desnudo baculoviral en liposomas para su transfección al cultivo de células de insecto Sf9. Se utilizaron, además, análisis de Western blot (que se revelaron por quimioluminiscencia e hidrólisis de peróxido de hidrógeno) para la
identificación de la expresión de la proteína gp120. Los resultados obtenidos demostraron la generación de dos baculovirus recombinantes que expresaron la gp120 del paciente mexicano de SIDA o el plásmido de referencia. Se discute el potencial de utilizar a los baculovirus recombinantes de gp120 como vacunas del VIH en México.


Palabras claves: VIH, gp120, SIDA, pacientes Mexicanos, baculovirus, cultivo de células de insecto.

HIV, gp120, AIDS, Mexican patient, baculovirus, insect cell culture.
Resumen

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Joint United Nations Programme on HIV/AIDS (UNAIDS)http://www.unaids.org/Unaids/EN/Resources/Epidemiology/epidemicupdateslides.asp 2003.

Heilman, C. 1998. Division of Acquired Immunodeficiency Syndrome. In The Jordan Report 98: Accelerated development of vaccines. B. Gellin, editor. Division of Microbiology and Infectious

Diseases, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health. USA. 95-113

Idem.

Idem.

Palomares, L.A., F. Kuri-Breña, and O.T. Ramirez. 2002. Industrial recombinant protein production. In D. Al Gobaisi , editor. The Encyclopedia of the life support systems EOLSS

Publishers Co. LTD, UK.1-48.

Idem.

Rivera-Morales,L.G., V.A. Novitsky, J.R. Trujillo, C. Lavalle-Montalvo, C. Cano-Dominguez, J. Ramos-Jimenez, E. Jimenez-Rios, L. Flores-Flores, P. Lopez-Guillen, P. Gilbert, F. Vannberg, R.S.

Tamez-Guerra, C. Rodriguez-Padilla, and M. Essex. 2001. The Molecular Epidemiology of HIV Type 1 of Men in México. AIDS Res Human Retroviruses. 17(1); 87 - 91.

Delwart, E. L., E.G. Shaper, J. Louwagie, F.E. McCutchan, M. Grez, H. Rubsamen-Waigmann, and J.I. Mullins 1993. Genetic relationships determined by a DNA heteroduplex mobility assay:

analysis of HIV-1 env genes. Science. 262:1257-1261.

Invitrogen Life Technologies. 2002. Instruction manual of HTP TOPO TA Cloning Kit. Version D.USA.

Invitrogen Life Technologies. 2002. Instruction manual of Bac-to-Bac baculovirus expression system Version C. USA.

Idem.

Idem.

Luckow, V. A., S. C. Lee, G.F. Barry, and P.O. Olins 1993. Efficient generation of infectious recombinant baculoviruses by site specific transposon-mediated insertion of foreign genes into a

baculovirus genome propagated in Escherichia coli. J. Virol. 67: 4566-4579.

Idem.

Idem.

Idem.

Sambrook, J., E.F. Fritsch and T. Maniatis 1989. Molecular cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. USA. Ap.13.2-1.34.

Luckow, V. A., et.al., Op.cit.

Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit.

Idem

Invitrogen Life Technologies. 2002., Op.cit.

Idem.

Sambrook, J., and D.W. Russell 2001. Molecular Cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. USA. Ap. A.8.54.

Gooche, C. F., M.J Gramer,. D.C Andersen,. J.B Bahr,.and J. Rasmussen 1991. The oligosaccharides of glycoproteins. Biotechnology 9:1347-1355.

Sánchez-Vizcaíno, J.M. 2001. Digital course of immunology and disease in farm animals. Universidad Complutense de Madrid. ISBN: 84-699-4740-0. http://www.sanidadanimal.info.

Idem.

Miao, J., X. Cong, and W. Tan 1998. Rapid construction of recombinant baculovirus carrying hepatitis B virus surface antigen gene by using a novel baculovirus shuttle vector (Bacmid). Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. 12:245-248.

Hou, L. H., G.X. Du, R.B. Guan, Y.G. Tong and H.T. Wang 2003. In vitro assay for HCV serine proteinase expressed in insect cells. World J. Gastroenterol. 9:1629-1632.

Li, B., H.Y. Wu, X.P. Qian, Y. Li, and W.F. Chen. 2003. Expression, purification and serological analysis of hepatocellular carcinoma associated antigen HCA587 in insect cells. World J.

Gastroenterol. 9:678-682.

Chimeno-Zoth, S., O. Taboga, G. König, A. Pereda, E. L. Palma and M. E. Piccone. 2001. Expresión y caracterización de dos proteínas estructurales del virus de la diarrea viral bovina

(VDVB). Rev. Arg. Microbiol.. 33:33-38.

Geng, Z. H., Y. Liu, P. Gao, D.M. Zhao, S. Li, X.D. Yu and B.Z. Zhang 2002. Enhancing hGH expression level in insect cells by shortening the 5'-UTR of hGH cDNA. Sheng Wu Gong Cheng

Xue Bao. 18:505-508.

Smith, G.E., M.D. Summers and M.J. Fraser 1983. Production of human b-interferon in insect cells infected whit a baculovirus expressions vector. Mol Cell Biol. 3:2156–2165.

Heilman, C. 2002. Human Immunodeficiency Virus (HIV) disease. In The Jordan Report: 20thAnniversary, Accelerated development of vaccines 2002. S. Landry, editor. National Institute of Health, US Department of Health and Human Services, USA. 126-131.

Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit.

Heilman, C., Op.cit.

Idem.

Idem.

Reitter, J. N., R.E. Means and R.C. Desrosiers 1998. A role for carbohydrates in immune evasion in AIDS. Nat. Med. 4:679-684.

Chakrabarti, B. K., W. Kong, B. Wu, Z.Y. Yang, J. Friborg, X. Ling, S.R. King, D.C. Montefiori and G.J. Nabel 2002. Modifications of the Human Immunodeficiency Virus envelope glycoprotein

enhance immunogenicity for genetic immunization. J. Virol. 76:5357-68.

André, S., B. Seed, J. Eberle, W. Schraut, A. Bultmann and J. Haas 1998. Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gp120 sequence with optimized codon

usage. J. Virol. 72:1497-1503.

Idem.

Rivera Morales, L.G., et.al., Op.cit.

Tramont, E.C. and M.I. Johnston, M.I. 2003. Progress in the development of an HIV

vaccine. Expert Opin Emerg Drugs. 8:37-45.

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Publicado

2005-10-10

Cómo citar

Ramos Alfano, G., Tamez-Guerra, P., Rivera-Morales, L., Tamez-Guerra, R., Gomez-Flores, R., & Rodriguez-Padilla, C. (2005). EXPRESSION OF HIV TYPE 1 GLYCOPROTEIN 120 FROM A MEXICAN AIDS PATIENT IN A BACULOVIRUS SYSTEM. RESPYN Revista Salud Pública Y Nutrición, 6(3). Recuperado a partir de https://respyn.uanl.mx/index.php/respyn/article/view/150

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